[00234945]稱豬病毒性、傳染性疾病綜合診斷與防疫技術推廣應用

（一） 項目來源 本項目為黑龍江省科技廳重點科技示范推廣項目。項目編號：TC10B0701；項目執行時間：2010.10-2012.12。項目驗收時間：2014.8.29。 （二）技術原理及性能指標 本項目主要集成基因組制備技術、cDNA合成技術和PCR技術制備出能夠檢測豬瘟病毒、豬細小病毒和豬偽狂犬病毒的三重PCR檢測試劑盒。試劑盒穩定性：在-20℃條件下可以穩定保存半年以上；特異性：能夠準確地鑒別豬瘟病毒、豬細小病毒和豬偽狂犬病毒，特異性達90%以上；敏感性：試劑盒對豬瘟病毒、豬細小病毒和豬偽狂犬病毒檢測可以達到基因ng水平。 （三）技術的創造性與先進性 在國內首次開發出用于檢測豬瘟病毒、豬細小病毒、豬偽狂犬病毒感染的三重PCR檢測試劑盒。該技術可以從基因ng水平對豬瘟病毒、豬細小病毒、豬偽狂犬病毒進行鑒別診斷。該方法敏感度高，特異性強，適合于疾病的快速診斷。最大特點是能夠在同一批次試驗中同時檢測三種病原，不但可以降低診斷成本，也節省了操作時間，特別是形成試劑盒以后，其操作程序標準化可以降低污染機率進一步縮短工作時間。本產品形成以后為豬繁殖障礙性疾病診斷和進一步的凈化計劃提供了有力的保障。同時，在試劑盒組裝過程中，把試劑盒分成盒體和盒蓋，盒體內設有襯墊，襯墊上設有放置診斷試劑藥品的容器孔，所述的盒體內部設置有隔板，隔板將盒體內分為低溫區域和常溫區域，其中，低溫區域內壁上套裝有保溫泡沫板，并且在該區域內裝有制冷劑。使得不影響常溫區域的藥品正常使用的同時又使低溫區域的藥品處于低溫的狀態，延長了使用時間，為獲得更準確的診斷結果提供了保障。 （四）技術的成熟程度，適用范圍和安全性 本項目已經少量裝配成多重PCR檢測試劑盒，在黑龍江省內10余個規?；i場和養殖合作社以及大慶市、安達市、肇東市和綏化市等地區的200余個散養戶中示范應用，檢測樣本750多份。應用過程中與國內外同類產品進行比較研究，特異性與單重PCR檢測試劑盒特異性符合率100%，與已知樣本符和率100%；經改進后的試劑盒最佳退火溫度為56.2℃，敏感性達到單重PCR檢測水平，穩定性實驗結果表明，保存8個月內可以對豬瘟、豬細小病毒病和豬偽狂犬進行有效鑒別診斷。本試劑盒可用于包括種豬在內的各年齡段豬只豬瘟、豬細小病毒病和偽狂犬的診斷，可應用與感染各個階段。但是，對這三重PCR檢測試劑盒的組裝技術需要進一步熟化，實現規?；?、商品化的推廣應用。